Получение и использование моноклональных антиидиотипических антител в иммунодиагностике описторхоза
Область применения: ветеринария и медицина
Краткое описание: Разработан технологический регламент изготовления и применения «ИФА-теста для серологической диагностики описторхоза». Основные компоненты тест-системы – иммуносорбент и иммуноферментный конъюгат. Иммуносорбент представляет собой полистироловый планшет, лунки которого сенсибилизированы моноклональными антиидиотипическими антителами (МАИАТ) штамма гибридомы 4H10D8 против паратопа моноклональных антител (МКА), продуцируемых другой гибридомой с авторским названием 4B3D9, имеющих специфичность к антигенной детерминанте экскреторно-секреторного антигена (ЭС-Аг) Opisthorchis felineus. Конъюгат – меченые пероксидазой хрена МКА 4B3D9, специфичные к антигенной детерминанте ЭС-Аг паразита. Принцип «ИФА-теста для серологической диагностики описторхоза» основан на конкурентном ИФА. Антитела к ЭС-Аг O. felineus в образцах исследуемой сыворотки крови и МКА конъюгата конкурируют за сайты связывания МАИАТ, иммобилизованных на твердой фазе. Иммунные комплексы, образованные иммуносорбентом и конъюгатом, выявляют с помощью субстрата фермента. В качестве последнего используют субстрат пероксидазы (перекись водорода) и хромоген (тетраметилбензидин – ТМБ). Пероксидазную реакцию останавливают, добавляя стоп-реагент, и измеряют оптическую плотность смеси в лунках, которая при длине волны 450 нм обратно пропорциональна концентрации специфических антител в образцах сывороток крови. Инновационность: «ИФА-теста для серологической диагностики описторхоза» отличается от своих аналогов тем, что в нем антиген паразита заменен на МАИАТ, который представляет собой «внутренний образ» эпитопа белка ЭС-Аг возбудителя описторхоза. Данное новшество позволяет повысить специфичность тест-системы и стандартизировать основные реагенты диагностикума. Конкурентоспособность: Использование МАИАТ будет способствовать существенному снижению себестоимости продукции, так как отпадает необходимость в проведении трудоемких этапов работ по получению антигена O.felineus. Для наработки последнего достаточно будет разморозить штамм-продуцент и культивировать его в питательной среде или in vivo в организме мышей.
Защита интеллектуальной собственности: Штаммы гибридом, продуцирующие МКА и МАИАТ защищены инновационными патентами РК (Патентообладатель КазАТУ; Опубл.16.11.2015, Бюл.№11.)
Степень готовности для практической реализации: Завершенный НИР.
Внедрение результатов исследований: Штаммы гибридом депонированы в Коллекции микроорганизмов РГП «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности» Комитета науки МОН РК
Социально-экономический эффект: Использование «ИФА-теста для серологической диагностики описторхоза» позволит повысить эффективность диагностики за счет раннего выявления больных людей, что приведет к снижению социального ущерба от описторхоза.
Требуемое финансирование: требуется финансирование в объеме 30,0 млн.тенге для создания экспериментально-промышленного образца набора «ИФА-тест для серологической диагностики описторхоза»
Предполагаемая форма сотрудничества: самостоятельное производство.
Авторы проекта, контакты: д.в.н., проф. Булашев А.К., к.в.н., доцент, Сураншиев Ж.А., к.б.н. Серикова Ш.С., Ескендирова С.Е., Токпан С.С.; АО «Казахский агротехнический университет им. С.Сейфуллина», г. Астана, пр. Победы,62, тел.: 8-701-516-84-06, E-mail: aytbay57@mail.ru
